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G-500液相色谱仪饮料中咖啡因含量检测



G-500液相色谱仪饮料中咖啡因含量检测

 

定量测定咖啡因的传统分析方法是采用萃取分光光度法。现在采用G-500液相色谱仪将饮料中的咖啡因与其它组分(如:单宁酸、咖啡酸、蔗糖等)分离后,采用外标法测定饮料中的咖啡因含量。

 

 一、仪器和试剂

1G-500系列高效液相色谱仪(赛析科技)

2、色谱柱:Vertex C185µ 150×4.6mm(进口)

3、流动相:30%甲醇(色谱纯)+70%高纯水;流动相进入色谱系统前,用超声波发生器脱气10min

4咖啡因标准贮备溶液:将咖啡因在110℃下烘干1h。准确称取0.1000g咖啡因,用二次蒸馏水溶解,定量转移至100mL容量瓶中,并稀释至刻度。标样浓度1000μg·mL-1

5测饮料试液:可乐,茶叶,速溶咖啡。

620μL平头微量注射器。

 

、实验内容

1、 标准贮备液配制质量浓度分别为20406080μg·mL-1的标准系列溶液。(1mL2mL3mL4mL稀释为50mL

2、 谱仪器条件:

泵的流速:1.0mL/min;检测波长:275nm;进样量:10μL;柱温:室温。

3、 仪器基线稳定后,进咖啡因标准样,浓度由低到高。

4、 品处理如下:(1)将约25mL可口可乐置于一100mL洁净、干燥的烧杯中,剧烈搅拌30min或用超声波脱气5min,以赶尽可乐中二氧化碳。(2)准确称取0.04g速溶咖啡,用90℃蒸馏水溶解,冷却后待用。(3)准确称取0.04g茶叶,用20mL蒸馏水煮沸10min,冷却后,将上层清液,并按此步骤再重复一次。将上述三种样品分别转移至50mL容量瓶中,并定容至刻度。

5、 上述三份样品溶液分别进行干过滤(即用干漏斗、干滤纸过滤),弃去前过滤液,取后面的过滤液,备用。

6、 别取5mL可乐、咖啡饮料和茶叶水用0.45µm的过滤膜过滤后,注入2mL样品瓶中备用。

7、 G-500高效液相色谱仪操作规程”分析饮料试液。

 

 

关键词:饮料中咖啡因,高效液相色谱法,G-500液相色谱仪,浙江大学食品研究(www.htcoo.com

                                                       

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